تعداد نشریات | 161 |
تعداد شمارهها | 6,532 |
تعداد مقالات | 70,501 |
تعداد مشاهده مقاله | 124,099,479 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 97,206,949 |
انتقال ژنEGFP به کلونی اسپرماتوگونی گوساله به روش لیپوفکسیون | ||
مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research) | ||
مقاله 18، دوره 71، شماره 2، تیر 1395، صفحه 229-236 اصل مقاله (1.68 M) | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22059/jvr.2016.57921 | ||
نویسندگان | ||
زهرا فضل الهی1؛ پرویز تاجیک1؛ خسرو حسینی پژوه2؛ گلشید جاودانی شاهدین* 1 | ||
1گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران- ایران | ||
2گروه بیوتکنولوژی، سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران، تهران- ایران | ||
چکیده | ||
زمینه مطالعه: در بالغین، سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs) تنها سلولهای بنیادی هستند که قادر به انتقال اطلاعات ژنتیکی به نسل بعد میباشند. با در نظر گرفتن این که یک SSC منفرد میتواند به تعداد زیادی از اسپرماتوزوآ تبدیل شود، دستکاری ژنتیکی این سلولها یک تکنولوژی نوین با کاربردهای عملی در گونههای مختلف حیوانی را مهیا میسازد. هدف: در این مطالعه ارزیابی انتقال ژن (EGFP)رEnhanced Green Fluorescent Protein به کلونیهای اسپرماتوگونی گاوی از طریق حامل لیپوزومی و بهترین روز انکوباسیون در جذب ژن توسط کلونیهای اسپرماتوگونی بررسی شد. روش کار: کارایی انتقال ژن خارجی EGFP به SSCs از طریق Lipofection در سه روز از شروع کشت کلونیهای اسپرماتوگونی (روز4،6 و8) توسط میکروسکوپ فلورسنت ارزیابی شد .توسط رنگ آمیزی ایمنوسیتوفلورسنت علیه مارکرهای OCT4 و Vimentin، ماهیت SSCs و سلولهای سرتولی تأیید شد. نتایج: نتایج نشان داد که کلونیهای ترانسفکت شده از طریق lipofection در هر سه روز انجام ترانسفکشن در مقایسه با گروههای شاهد به طور معنیداری افزایش یافت (0.05>p). کلونیهای ترانسفکت شده در مقایسه با گروههای بدون حامل ژن خارجی نیز بالاتر بود (معنیدار) نرخ آلوده سازی کلونی زمانی که ترانسفکشن در روز 4 کشت انجام شد بود بیشتر بود. نتیجهگیری نهایی: نتایج بدست آمده از این مطالعه پیشنهاد میکند که لیپوفکتامین میتواند به منظور انتقال مستقیم DNA خارجی به کلونی اسپرماتوگونی به ویژه در روز 4 کشت به صورت ایمن به کار رود. | ||
کلیدواژهها | ||
ترانسفکشن؛ سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی؛ lipofectamine | ||
مراجع | ||
Anway, M.D., Folmer, J., Wright, W.W. (2003) Isolation of sertoli cells from adult rat testes: an approach to ex vivo studies of sertoli cell function. Biol Reprod. 68: 996-1002. Bellue, A.R., Caricchia, J.C., Millette, C.F., O’Brien, D.A., Bhatnagar, Y.M., Dym, M. (1977) Spermatogonic cells of the prepubertal mouse. Isolation and characterization. J Cell Biol. 74: 1-9. Brinster, R.L., Avarbock, M.R. (1994) Germline transmission of donor haplotype following spermatogonial transplantation. Proc Natl Acad Sci. 91: 11303-7. Dirami, G., Ravindranath, N., Pursel, V., Dym, M. (1999) Effects of stem cell fact or and granulocyte macrophage-colony stimulationg factor on survival of porcine type A spermatogonia culture in KSOM. Biol Reprod. 61: 225-230. Felgner, P.L., Gadek, T.R., Holm, M., Roman, R. (1987) Lipofection : a highly efficient, lipid-mediated DNA-transfection procedure. Proc Natl Sci. 84: 7413-7417. Garrett, F.E., Goel, SH., Yasul, J., Koch, R.A. (1999) Liposome fuse with sperm cells and induce activation by delivery of impermant agents. Biochimica et Biophysica Acta. 1417: 77-88. Horfmann, M.C. (2008) Gdnf signaling pathways whitin the mammalian spermatogonial stem cell niche. Mol Cell Endocrinol. 288: 95-103. Hui-ming, J., Bal, L., Ren, H., MU, Y. (2011) Production of transgenic mice by type A spermatogonia-mediated gene transfer. Agricult SciChina. 10: 431-437. Izadyar, F., Creemers, L.B., Van Dissel-Emiliani, F.M. (2000) Spermatogonial stem cell transplantation. Mol Cell Endocrinol. 169: 21-26. Izadyar, F., Sepierenberg, G.T., Creemers, L. B., Ouden, K., Rooij, D.G. (2002) Isolation and purification of type A spermatogonia from the bovine testis. Reproduction. 124: 85-94. Koruji, S.M., Movahedin, M., Mowia, S.J. (2007) Colony formation ability of frozen thawed spermatogonial stem cell from adult mouse. Iran J Reprod Med. 5: 109-115. Kubota, H., Brinster, R.L. (2008) Culture of rodent spermatogonial stem cells, male germline stem cells of the postnatal animal. Methods Cell Biol. 86: 59-84. Lai, Y., Drobinskaya, I., Chuguang, L. (2008) Genetic modification of cells fpr transplantation. Advanced Drug Delivery Reviews. 60: 146-159. Morena, A.R., Boitani, C., Pesce, M., De felici, M., Stefanini., M. (1996) Isolation of highly purified type A spermatogonia from prepubertal rat testis. J Androl. 17: 708-717. Nagona, M., Clayton, J., Kley, E., Mary, R. (2001) Transgenic mice produced by retroviral transduction of male germ-line stem cells. PNAS. 98: 13090-13095. Niu, Y., Liang, SH. (2008) Progress in gene transfer by germ cells in mammals. J Genet Genomics. 35: 701-714. Ogachi, S., Kamihira, M., You, J., Tachibana, A., Lijima, Sh. (1998) Exogene gene transfection into quail embryo using cationic lipid vesicles. J Fermentation and Bioengineering. 86: 118-120. Qasemi-Panahi, B., Tajik, P., Movahedin, M., Moghaddam, G., Barzgar, Y., Heidari-vala, H. (2011) Differentiation of bovine spermatogonial stem cells into osteoblasts. Avicenna J Med Biotechnol. 3: 149-153. Sciamanna, I. (2002) DNA dose and sequence dependence in sperm-mediated gene transfer. Mol Reprod Develop. 56: 301-305. Tajik, P., Barin, A., Movahedin, M. (2012) Nestin, a neuroectodermal stem cell marker, is expressed by bovine sertoli cells. Comp Clin Pathol. 21: 395-399. Takehashi, M., Kanatusa-Shinohara M., Ogonuki N., Miki, H., Toyokuni, SH., Shinohara, T. (2007) Adenovirus-mediated gene delivery into mouse spermatogonial stem cells. PNAS. 104: 2596-2601. Xiang-yang, M. (2011) Production of transgenic animals using spermatogonial stem cells. Agricult Sci China. 10: 762-768. Younezawa, T., Furahata, Y., Hirabayashi, K., Suzuki, M., Yamanouchi, K. (2002) Protamine-Drived synthetic enhanced the efficiency of sperm-mediated gene transfer using liposome-peptid-DNA complex. J Reprod Develop. 48: 281-286. | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,055 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 956 |